S. Dochi 및 D. Goldstein, Tagra Biotechnologies Ltd. SOFW Journal, 140, 8-2014.

초록

레티놀은 상피 세포의 성장 및 분화 조절에 중요한 역할을 합니다. 콜라겐 생성을 촉진하고 세포 재생을 가속화하며 피부 각화 과정을 정상화하여 더 젊고 깨끗하며 건강해 보이는 피부를 가꾸어 줍니다. 그러나 레티놀은 가장 인기 있는 스킨케어 성분 중 하나이지만, 특유의 불안정성으로 인해 제품 개발자들에게 특정 문제를 일으키고 스킨케어 제형 개발에 많은 어려움을 안겨줍니다.

본 논문에서는 레티놀의 효능을 보장하는 동시에 안정성을 높이기 위해 용매 추출법을 이용한 레티놀 마이크로캡슐의 제조에 대해 설명합니다. 제조된 레티놀 마이크로캡슐의 물리화학적 특성, 안정성 및 효능을 조사하였습니다.

확립된 마이크로캡슐 제조 공정을 통해 평균 입자 크기가 35 µm이고 7%의 레티놀이 담지된 구형 마이크로캡슐을 얻었습니다. 안정성 평가 결과, 캡슐화된 레티놀을 배합했을 때의 평균 상대 레티놀 함량이 유리 레티놀에 비해 유의미하게 더 높은 것으로 나타났습니다. 또한, 인체 적용 시험(in-vivo)을 통해 캡슐화 공정이 안티에이징/주름 개선제로서의 레티놀의 피부과적 활성을 효과적으로 보존함을 명확히 확인하였습니다.

서론

최근 몇 년 동안 보다 건강한 삶을 추구하는 경향의 일환으로 소비자들은 피부 건강에 미치는 유효 성분의 이점을 더욱 잘 인지하게 되었습니다 (1, 2). 이에 따라 화장품 제형 연구원들은 피부 건강을 개선하고 젊음의 광채를 유지하며 피부 질환을 예방할 수 있는 비타민, 펩타이드, 에센셜 오일, 항산화제와 같은 다양하고 독특한 활성 성분을 활용하여 새로운 스킨케어 제품을 혁신하고 설계할 수 있는 기회를 끊임없이 모색하고 있습니다 (3).

하지만 이러한 혁신적인 제품들은 화장품 업계에 새로운 도전 과제를 제시합니다. 대부분의 활성 성분이 화장품 제형에 혼합되면 쉽게 분해되어 효능 손실을 초래하기 때문입니다. 열, 극한의 pH 조건, 산화제에 대한 노출 및 제형을 구성하는 다른 성분과의 비호환성은 모두 효능 부족과 안정성 저하로 이어져 궁극적으로 소비자의 신뢰도를 떨어뜨릴 수 있습니다.

이러한 제형상의 한계를 극복하고 제형 연구원 및 제품 개발자에게 요구되는 기술적 우위를 제공하기 위해 다양한 전달 시스템이 활용되고 있습니다. 전달 시스템을 사용함으로써 제형 연구원은 활성 성분을 안정화하고, 동일한 포뮬러 내에서 비호환성 성분의 배합을 가능하게 하며, 효과 개선을 위한 표적 전달을 구현하여 퍼스널 케어 또는 화장품 제형의 기능을 향상시킬 수 있습니다.

마이크로캡슐화(Microencapsulation)는 주변 환경으로부터 활성 성분을 보호하고 안정화하는 대표적인 기술로, 최종 적용 시 활성 성분의 방출을 제어하고 결정할 수 있습니다 (4, 5). 본 연구의 목적은 화장품 적용을 위해 레티놀의 안정성을 높이고 효율적인 전달을 보장하며 치료적 효능을 보존하는 데 있습니다.

레티놀은 비타민 A의 한 형태입니다. 이는 상피 세포 성장 및 분화 조절에 중요한 역할을 하며, 콜라겐 생성을 촉진하고 세포 재생을 가속화하며 피부 각화를 정상화합니다. 또한 광노화, 심상성 여드름, 건선 및 주름과 같은 다양한 피부과적 상태 및 피부 질환에 효과적인 치료제인 것으로 밝혀졌습니다 (6, 7, 8, 9). 레티놀은 피부 탄력, 매끄러움 및 부드러움을 유의미하게 개선하여 피부를 더 젊고 맑으며 건강하게 가꾸어 줍니다.

레티놀은 스킨케어 분야에서 가장 인기 있는 성분 중 하나이지만, 잘 알려진 불안정성(10, 11)으로 인해 제품 개발자에게 일정한 문제를 야기하고 스킨케어 제형화에 많은 난관을 초래합니다. 리포솜, 미셀, 에멀젼 및 지질 나노입자와 같은 다양한 전달 시스템이 레티놀의 안정성을 개선하기 위해 고안되었으나 (12, 13, 14), 그 성과는 제한적이었습니다.

본 논문에서는 Tagra Biotechnologies의 특허받은 마이크로캡슐화 기술로 제조된 레티놀 마이크로캡슐인 Tagravit™ R1의 제조 방법을 설명합니다. 이러한 레티놀 마이크로캡슐의 물리화학적 특성, 안정성 및 효능을 조사하였습니다.

재료 및 방법

Retinol 5°C는 BASF에서 구매하였습니다. 폴리메틸 메타크릴레이트(PMMA) 및 폴리비닐 알코올(PVA)은 Sigma에서 구매하였습니다. 1,2,3-트리옥타노일글리세롤(트리카프릴린)은 Abitec에서 구매하였습니다. 디부틸히드록시톨루엔(BHT)은 Lanxess GmbH로부터 조달하였습니다. 사용된 다른 모든 시약은 고순도 또는 HPLC 등급이었습니다.

Tagravit™ R1 마이크로캡슐 제조

레티놀을 함유하는 Tagravit™ R1 마이크로캡슐은 용매 추출법으로 제조되었습니다 (15, 16). 마이크로캡슐은 유기 용매에 PMMA를 용해시켜 균질한 폴리머 용액을 형성함으로써 제조되었습니다. 폴리머 용액에 교반하면서 레티놀을 첨가한 후, 유기상에 트리카프릴린과 BHT를 첨가하였습니다.

유기상을 0.2% PVA를 함유한 수상과 혼합하고 교반하여 에멀젼을 형성하였습니다. 이 에멀젼을 추출 수상으로 이송하였습니다. 이 단계에서 유기 용매의 추출로 인해 액적이 후속적으로 견고한 마이크로캡슐로 응고되었습니다. 마이크로캡슐이 침강된 후 여과를 통해 수집하고 물로 세척하여 불순물을 제거하였습니다. Tagravit™ R1 마이크로캡슐을 동결건조하여 자유 유동 분말을 얻었습니다.

레티놀 함량, 포집 효율 및 수율 측정

레티놀은 가변 자외선 검출기가 장착된 JASCO HPLC UV-975 시스템(JASCO Analytical Instruments, 일본)을 사용하는 역상 HPLC로 정량 분석되었습니다. 분리는 Eurospher-100 컬럼(4 nm, 25 cm × 4 mm I.D.)을 사용하고 95% v/v 메탄올 및 5% v/v THF를 함유하는 등용매 이동상을 1.0 ml/min의 유속으로 흘려주어 수행되었습니다. 레티놀은 325 nm에서 검출되었습니다.

Tagravit™ R1 마이크로캡슐 40 mg의 무게를 측정하여 5 ml 디클로로메탄(DCM)에 용해시킨 후, 메탄올로 적절히 희석하였습니다. 여과된 샘플을 HPLC로 분석하였습니다. 마이크로캡슐 내 레티놀 함량(w/w %)은 마이크로캡슐 중량 대비 측정된 마이크로캡슐 내 레티놀 함량으로 정의되었습니다. 포집 효율 수준은 다음 공식을 사용하여 계산되었습니다:

캡슐화 효율(%) = 추정 함량 / 이론 함량 × 100

생산 수율은 %수율 = W/Wo × 100으로 측정 및 계산되었으며, 여기서 W는 마이크로캡슐의 중량이고 Wo는 레티놀, BHT, 트리카프릴린 및 폴리머의 총 예상 중량입니다.

입자 크기 및 형태학적 특성 분석

마이크로캡슐의 크기 및 입도 분포는 HORIBA LA-300 레이저 회절 입도 분포 분석기(HORIBA Ltd., 일본)를 사용하여 분석되었습니다. 마이크로캡슐은 각 측정 전에 연질 증류수에 현탁되었습니다. 모든 측정은 25°C에서 일정한 산란각(6개의 광각 검출기)으로 수행되었습니다. 모든 데이터 분석은 자동 모드로 수행되었습니다.

Tagravit™ R1 마이크로캡슐의 형태는 주사전자현미경(SEM 505, Philips, Eindhoven, 네덜란드)으로 특성화되었습니다. SEM 관찰용 시편은 양면 접착 테이프를 사용하여 SEM 그리드에 마이크로캡슐을 직접 장착하고 감압 하에 백금으로 코팅한 후 주사전자현미경(Magellan™ 400L)에 넣어 준비되었습니다.

안정성 연구

Tagravit™ R1의 안정성을 평가하고 유리 레티놀과 비교하였습니다. 안정성은 시간에 따른 레티놀 함량(초기값 대비 %)을 측정하여 평가되었습니다. 또한 Tagravit™ R1 또는 유리 레티놀이 혼합된 제형의 외관 관찰을 통해 제품 안정성을 정성적으로 측정하였습니다.

캡슐화된 레티놀과 유리 레티놀을 o/w 베이스 크림 및 수성 겔 베이스 제형(pH 7.3)에 혼합하고, 차광된 밀폐 유리 용기 내에서 4°C, 25°C 및 40°C 조건으로 배양하였습니다.

제형 내 레티놀 함량을 측정하기 위해 다음과 같은 추출 방법이 사용되었습니다. 크림 및 겔 샘플(2 g)의 무게를 재고 5 ml DCM과 혼합하여 2분간 용해시킨 후, 25°C에서 6K rpm으로 5분간 원심분리하여 분리하였습니다. 상층액을 제거하여 별도의 용기로 옮겼습니다. 추출 절차를 2회 반복하였습니다. 수집된 상층액을 적정량의 메탄올로 희석하였습니다. 모든 샘플을 여과한 후 HPLC로 분석하였습니다.

인체 적용(In-Vivo) 효능 시험

캡슐화된 레티놀의 안티에이징 활성을 평가하기 위해 무작위 블라인드 임상 연구가 수행되었습니다. 임상 시험은 헬싱키 선언에 따라 진행되었습니다. 연구는 인간 피부의 고속 광학 생체 내 위상 측정(FOITS) 기술을 사용하여 수행되었습니다 (17, 18).

피험자들은 무작위 배정에 따라 베이스 나이트 크림(n=28) 또는 레티놀 마이크로캡슐 함유 베이스 나이트 크림(n=25)을 4주 동안 1일 2회 도포하였습니다. 28명의 피험자는 아무런 처치도 하지 않은 음성 대조군으로 사용되었습니다. 본 연구 기간 동안 참가자들의 추가 화장품 사용은 일절 금지되었습니다.

눈가 주위 영역(피험자당 2개 영역)을 테스트하였습니다. 각 테스트 영역은 깊게 두드러진 주름 부위(눈가 잔주름, 영역 1)부터 덜 두드러진 형태 부위(눈에서 더 먼 부위, 영역 5)까지 5개 구역으로 구분되었습니다. 눈가 부위의 형태학적 구조를 분석하기 위해 Rz(평균 거칠기 깊이)와 Ra(산술 평균 거칠기)의 두 가지 매개변수를 측정하였습니다 (19).

피부 프로파일에 대한 레티놀의 잠재적 영향을 평가하기 위해, -600 µm에서 +600 µm 범위에 대해 5 µm 간격으로 기준치 및 최종 값의 깊이 주파수 분포(FDD)를 계산하였습니다. 깊이 단면은 미세 구조(0-50 µm), 미세-중간 구조(55–170 µm) 및 거친 구조(>170 µm)로 구분되었습니다. 더 깊은 깊이(>170 µm: 거친 구조)에서 감소가 일어나고 더 낮은 깊이(<170 µm: 미세 구조)에서 FDD 증가가 측정되는 경우 긍정적인 효과가 있는 것으로 결론지었습니다.

결과

마이크로캡슐 특성 분석

확립된 마이크로캡슐 제조 공정을 통해 87-93% 범위의 생산 수율로 7%의 레티놀을 함유하는 마이크로캡슐을 얻었습니다. 레티놀의 농도는 HPLC를 사용하여 모니터링되었으며, 표 1에 나타난 바와 같이 95%의 회수율(즉, 최종 관찰 농도 6.7% w/w)이 관찰되었습니다.

표 1: Tagravit™ R1 마이크로캡슐 내 레티놀의 평균 수율(%), 함량(% w/w) 및 포집 효율(%) (평균 ± 표준편차, n=4).

형태학적 특성

개발된 레티놀 마이크로캡슐은 옅은 노란색을 띠는 자유 유동 분말 형태로 나타납니다. SEM을 사용하여 마이크로캡슐을 관찰한 결과, 그림 1에 나타난 바와 같이 마이크로캡슐이 구형임을 확인하였습니다.

그림 1: 레티놀 마이크로캡슐(Tagravit™ R1)의 SEM 현미경 사진. 배율: (A) 5K/바 3 µm 및 (B) 0.5K/바 10 µm.

입자 크기

개발된 레티놀 마이크로캡슐의 평균 크기 및 입도 분포는 HORIBA LA-300 레이저 회절 입도 분포 분석기(HORIBA Ltd., 일본)로 측정되었습니다. 입자 크기 분석 결과는 표 2와 그림 2에 제시되어 있습니다. 레티놀을 함유한 마이크로캡슐의 평균 크기 값은 35 ± 5(평균 ± 표준편차 직경, µm)였습니다. 하나의 좁은 피크가 나타나는 것은 마이크로캡슐 모집단의 크기가 균일함을 나타냅니다.

표 2: 부피 기준 평균 마이크로캡슐 크기 및 크기 분포(직경, µm, 평균 ± 표준편차, n=4). 그림 2: Tagravit™ R1 마이크로캡슐의 평균 크기 및 입도 분포에 대한 대표 그래프.

안정성 결과

국소용 베이스 겔 제형(pH 7.3)에 각각 배합된 캡슐화된 레티놀과 유리 레티놀의 안정성을 비교 평가하였습니다. 각 샘플의 레티놀 상대 함량(초기값 대비 %)을 25°C 및 40°C에서 평가하였으며, 그림 3–4에 나타내었습니다.

안정성 결과에 따르면 캡슐화된 레티놀을 배합했을 때의 평균 상대 함량이 유리 레티놀에 비해 현저히 높은 것으로 나타났습니다. 25°C에서 550일 동안 보관된 샘플에서 얻은 결과는 레티놀의 평균 함량이 유리 레티놀에 비해 캡슐화된 형태에서 더 높았음을 보여줍니다(초기값 대비 각각 49% 및 0%, 그림 4).

또한 결과는 Tagravit™ R1에 캡슐화된 레티놀이 25°C에서 300일의 보관 기간 후에도 더 안정적임을 보여주었습니다. 레티놀의 평균 함량은 순수 레티놀 대비 Tagravit™ R1 마이크로캡슐에서 더 높았습니다(초기값 대비 각각 82% 및 10%).

겔 제형에서 Tagravit™ R1의 안정성을 육안으로 관찰하여 유리(비캡슐화) 레티놀과 비교하였습니다. 겔에는 40°C에서 360일 동안 0.1%의 레티놀(1.45%의 Tagravit™ R1)을 혼합하였습니다. Tagravit™ R1으로 제형화함으로써 겔 제형의 변색이 방지되는 것을 명확하게 확인할 수 있었습니다. Tagravit™ R1 마이크로캡슐은 화장품 제형 내 활성 원료인 레티놀을 산화 및 열화로부터 성공적으로 보호합니다.

• 그림 3: 40°C에서 100일 보관 후 베이스 겔 제형(pH 7.3)에 혼합된 유리 레티놀 대비 Tagravit™ R1 마이크로캡슐의 안정성. 데이터는 초기값 대비 평균 레티놀 함량 %로 표시됨(n=3).

• 그림 4: 25°C에서 550일 보관 후 베이스 겔 제형(pH 7.3)에 혼합된 유리 레티놀 대비 Tagravit™ R1 마이크로캡슐의 안정성. 데이터는 초기값 대비 평균 레티놀 함량 %로 표시됨(n=3).

• 그림 5: 순수 레티놀(우측) 대비 Tagravit™ R1 마이크로캡슐(좌측)이 배합된 베이스 겔 제형의 외관 관찰. 샘플은 40°C에서 (A) 1일, (B) 100일 및 (C) 360일 동안 배양됨.

인체 적용(In-Vivo) 효능 결과

피부에 대한 레티놀 마이크로캡슐의 효능 평가를 위해 인간 피부의 고속 광학 생체 내 위상 측정(FOITS) 기술이 사용되었습니다. 매개변수 Rz(평균 거칠기 깊이)와 Ra(산술 평균 거칠기)가 측정되었습니다.

그림 6은 4주간의 처리 후 각 시험 영역별 Rz 및 Ra의 평균 변화를 보여주며, 그림 7은 서로 다른 처치를 4주간 적용한 후 눈가 부위(5개 하위 영역의 평균)의 평균 변화를 나타냅니다. 베이스 나이트 크림은 거칠기 매개변수를 약 3% 증가시켰습니다.

결과에 따르면 Tagravit™ R1 마이크로캡슐이 함유된 베이스 나이트 크림은 베이스 나이트 크림 도포군 및 무처치 대조군과 비교하여 Rz 및 Ra를 모두 약 9% 유의미하게 감소시켰습니다.

세 실험군의 피험자로부터 얻은 초기값 대비 깊이의 평균 절대 변화량이 그림 8에 표시되어 있습니다. Tagravit™ R1 마이크로캡슐이 함유된 베이스 나이트 크림을 바른 피험자에게서 얻은 결과는 긍정적인 효과를 보여주었는데, 이 처치는 미세 구조에서 FDD 값을 증가(약 6%)시키고 거친 구조에서는 약 12% 감소를 유도하였습니다.

• 그림 6: 무처치 지원자와 비교하여 베이스 나이트 크림 및 Tagravit™ R1 마이크로캡슐 함유 베이스 나이트 크림을 4주간(t4w) 처리한 후 영역 1부터 5까지의 매개변수 Rz 및 Ra의 평균 변화. 영역 1은 눈에 인접한 부위, 영역 5는 눈에서 먼 부위.

• 그림 7: 무처치 지원자와 비교하여 베이스 나이트 크림 및 Tagravit™ R1 마이크로캡슐 함유 베이스 나이트 크림을 4주간 처리한 후 눈가 부위(5개 하위 영역의 평균)에서의 매개변수 Rz 및 Ra의 평균 변화.

• 그림 8: 무처치 지원자와 비교하여 베이스 나이트 크림 및 Tagravit™ R1 마이크로캡슐 함유 베이스 나이트 크림을 4주간 처리한 후 초기값 대비 평균 FDD 차이(%).

결론

레티놀은 스킨케어에서 가장 인기 있는 성분 중 하나이지만, 그럼에도 불구하고 제품 개발자에게 일정한 문제를 야기하며 스킨케어 제형화에 많은 난관을 부여합니다.

레티놀의 안정성을 높이고 그 역가와 효능을 보존하면서 효율적인 전달을 보장하기 위한 시도로, Tagravit™ R1이라는 상표명의 레티놀 마이크로캡슐이 용매 제거법을 통해 성공적으로 제조 및 생산되었습니다. Tagravit™ R1은 기계적 압력에 의해 레티놀을 방출하도록 설계되었습니다. 제형을 피부에 문지르며 도포할 때 폴리머 껍질이 붕괴되고 마이크로캡슐이 파쇄되기 시작하면서 캡슐화된 레티놀이 방출됩니다. 마이크로캡슐은 눈에 보이지 않는 미세한 입자로 부서지지만, 여전히 유효 물질의 일부를 유지하여 시간이 지남에 따라 지속적으로 방출합니다.

자유 유동 분말 형태로 제공되는 레티놀 마이크로캡슐은 구형이며 약 35 µm의 평균 입자 크기를 나타냅니다. Tagravit™ R1 마이크로캡슐은 98%의 캡슐화 효율로 7%의 레티놀을 함유하고 있습니다. 레티놀은 빛, pH, 산화제, 중금속 및 공기에 민감한 것으로 알려져 있기 때문에 화장품 제형화 시 안정성은 가장 중요한 요소 중 하나입니다. 본 연구의 결과는 Tagra Biotechnologies에서 제조한 Tagravit™ R1 마이크로캡슐이 다양한 제형 및 조건에서 유리 형태의 레티놀보다 현저히 안정적임을 보여줍니다. 또한 인체 적용 임상 시험에서 얻은 결과는 캡슐화 공정이 안티에이징/주름 개선제로서 레티놀의 피부과적 활성을 실질적으로 보존한다는 것을 명확히 보여줍니다.

따라서 레티놀 전달을 위해 사용되는 Tagravit™ R1은 레티놀의 효능을 발현하는 데 결정적인 역할을 할 것입니다. 레티놀은 극도로 불안정하여 빛과 공기에 노출되면 생물학적으로 비활성인 형태로 쉽게 분해되기 때문입니다.

저자 주소: Dr. Shaher Dochi and Dr. Danny Goldstein, Tagra Biotechnologies Ltd., Northern Industrial Park Tel-Hai, N. Galilee, 12100, Israel.

참고문헌

1. Pandel R., Poljšak B., Godic A., Dahmane R. (2013) Skin Photo-aging and the Role of Antioxidants in Its Prevention. ISRN Dermatology. 12, eCollection 2013

2. Poljsak B., Dahmane R., Godic A. (2013) Skin and antioxidants. Journal of Cosmetic and Laser Therapy. 15, 107-113

3. Chen L, Hu JY, Wang SQ. (2012) The role of antioxidants in photoprotection: a critical review. Journal of the American Academy of Dermatology. 67, 1013–1024

4. Augustin MA, Sanguansri L, Lockett T. (2013) Nano- and micro-encapsulated systems for enhancing the delivery of resveratrol. Annals of the New York Academy of Sciences. 1290, 107-112.

5. Ioannis S. (2009) Encapsulation and Controlled Release Technologies in Food Systems. International Journal of Food Science & Technology. 44, 1462–1463

6. Murray, J.C., Burch, J.A., Streilein, R.D., Iannacchione, M.A., Hall, R.P., and Pinnell, S.R. (2008) A topical antioxidant solution containing vitamins C and E stabilized by ferulic acid provides protection for human skin against damage caused by ultraviolet irradiation. Journal of the American Academy of Dermatology. 59, 418–425

7. Jacqueline M. (2010) Antioxidants and their chemopreventive properties in dermatology. Journal of the American Academy of Dermatology. 62, 4 663–665

8. Fisher GJ, Esmann J, Griffiths CEM, et al. (1991) Cellular, immunologic and biochemical characterization of topical retinoic acid-treated human skin. The Journal of Investigative Dermatology. 96, 699–707.

9. Varani, J., Warner, R.L., Gharaee-Kermani, M., Phan, S.H., Kang, S., Chung, J.H., Wang, Z.Q., Datta, S.C., Fisher, G.J., Voorhees, J.J. (2000) Vitamin A antagonizes decreased cell growth and elevated collagen-degrading matrix metalloproteinases and stimulates collagen accumulation in naturally aged human skin. The Journal of Investigative Dermatology. 114, 480–486

10. Murphy, P.A., B. Smith, C. Hauck and K. O'Connor (1992) Stabilization of Vitamin A in a Synthetic Rice Premix. Journal of Food Science. 57:437–439

11. Tan, X., N. Meltzer and S. Lindenbaum (1993) Determination of the Kinetics of Degradation of 13-cis-Retinoic and All-trans-Retinoic Acid in Solution. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 11, 817–822.

12. Lee SC, Kim JJ, Lee KE. (2005a) Effect of B-sitosterol in liposome bilayer on the stabilization of incorporated retinol. Food Science and Biotechnology. 14, 604-607

13. Jenning, V., Schafer-Korting, M., Gohla, S. (2000a) Vitamin A-loaded solid lipid nanoparticles for topical use: drug release properties. Journal of Controlled Release. 66, 115–126.

14. Lee SC, Yuk HG, Lee DH, Lee KE, Hwang YL, Ludescher RD. (2002) Stabilization of retinol through incorporation into liposomes. Journal of Biochemistry and Molecular Biology. 35, 358-363

15. Jelvehgari M, Montazam SH. (2012) Comparison of microencapsulation by emulsion-solvent extraction/evaporation technique using derivatives cellulose and acrylate-methacrylate copolymer as carriers. Jundishapur Journal of Natural Pharmaceutical Products. 7, 144-152.

16. Freitas S, Merkle HP, Gander B. (2005) Microencapsulation by solvent extraction/evaporation: reviewing the state of the art of microsphere preparation process technology. Journal of Controlled Release. 102, 313-332

17. Rohr, A. Schrader (2009) FOITS (Fast Optical in vivo Topometry of Human Skin) – A Classical Method in Modern Efficacy Testing – A History of Fringe-Projection in Cosmetics. SOFW J. 135, 2-10.

18. Rohr M., Brandt M., Schrader A. (2000) Skin surface - claim support by FOITS. SÖFW J 126(4), 56-62.

19. Piche E, Häfner HM, Hoffmann J, Jünger M. (2000) [FOITS (fast optical in vivo topometry of human skin): new approaches to 3-D surface structures of human skin]. Biomedizinische Technik. Biomedical Engineering. 45, 317-322.